如何避免HPLC分析中純水的干擾

2012-03-07 [820]

如何避免HPLC分析中純水的干擾？

為了消除HPLC分析中的干擾，應(yīng)該遵守以下一些規(guī)則：

高純水應(yīng)該在用水地點(diǎn)制取而不要放置；

所用的純水機(jī)應(yīng)該具備塑料組成、作為吸附和離子交換的純化裝置應(yīng)該為半導(dǎo)體級(jí)的質(zhì)量、應(yīng)該具備UV-氧化裝置和專門設(shè)計(jì)的過濾器；

水路系統(tǒng)、樣品前處理和脫氣裝置都應(yīng)在使用前沖洗干凈。新裝的過濾器應(yīng)該預(yù)先用8~10L水進(jìn)行沖洗。

每次取水時(shí)其前面的50~100ml水應(yīng)棄之不用。進(jìn)行樣品前處理和脫氣過濾時(shí)均應(yīng)按照廠家說明書進(jìn)行沖洗。玻璃容器應(yīng)該用薄膜蓋住。在400℃灼燒1h然后用薄膜蓋好備用。

除此之外本規(guī)則還適用于其他有機(jī)分析，包括總有機(jī)碳分析（TOC）、近紅外分析和GC/MS。

無論是質(zhì)譜分析、氣相色譜還是高效液相色譜，幾乎沒有一種分析方法可以不用純水能夠進(jìn)行的。本文討論了以下幾個(gè)問題：水的純度如何影響HPLC，水中有機(jī)物的污染來自何處，為了消除這些影響可以采用哪些技術(shù)？

水是分析實(shí)驗(yàn)室用得多的試劑，它每天被用來配制緩沖溶液、實(shí)驗(yàn)室試劑、校正標(biāo)準(zhǔn)溶液、培養(yǎng)基和樣品溶液。特別是高純水的應(yīng)用對(duì)于任何科學(xué)部門無論是科研還是制藥或者化妝品以及食品部門，都是的。

純水可以定義為一種不含有任何對(duì)實(shí)驗(yàn)室分析方法、試劑或者標(biāo)準(zhǔn)有潛在影響的物質(zhì)。鑒于在無數(shù)的方法實(shí)驗(yàn)以及在進(jìn)行包括液相、氣相、質(zhì)譜分析樣品制備時(shí)均需大量用水，因此純水的獲取便具有決定性的意義。

污染對(duì)HPLC的影響

現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)室儀器，例如電感耦合等離子光譜/質(zhì)譜（ICP/MS）、氣相色譜/質(zhì)譜（GC/MS）、高效液相色譜和熒光分析等的檢測(cè)限位于ppb-范圍或更低。正是由于這樣的數(shù)值使得遭遇污染的風(fēng)險(xiǎn)更高。水中有機(jī)痕量化合物的分析檢測(cè)日益成為實(shí)驗(yàn)室的一大問題，它可能影響色譜峰的分離度和積分、可能導(dǎo)致鬼峰、還可能改變固定相的選測(cè)性以及影響色譜基線。反相HPLC可以用來對(duì)有機(jī)物進(jìn)行鑒定和定量。為保證研究者取得精確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，必須降低或消除這些有機(jī)污染物。

此外，非有機(jī)類的污染也可能對(duì)實(shí)驗(yàn)帶來間接性的干擾，對(duì)此亦應(yīng)加以關(guān)注。水中污染物，例如無機(jī)離子、顆粒物或者溶解氣體，可能在樣品制備過程中與試劑或溶質(zhì)發(fā)生反應(yīng)、污染柱子或檢測(cè)器，降低使用壽命。在采集分析數(shù)據(jù)時(shí)為了取得準(zhǔn)確和重現(xiàn)性的測(cè)試結(jié)果，使用純水也是基本的要求。超微量HPLC則對(duì)純水的應(yīng)用提出了更為苛刻的要求。